黄杆菌肝素酶Ⅱ重组菌培养条件的优化及高密度发酵

发布时间：2015-09-07

【作者】 周斌； 程咏梅； 邓超； 刘卫超； 陈潮梁； 陈敬华； 许正宏；

生物工程学报 , Chinese Journal of Biotechnology,
2014年04期

【机构】 江南大学药学院； 江南大学无锡医学院；

【摘要】 黄杆菌肝素酶Ⅱ(HepⅡ)是一类可特异性切割肝素、硫酸乙酰肝素类分子内连接键的酶。文中对黄杆菌肝素酶Ⅱ重组菌的诱导时机、诱导剂添加量、诱导温度、诱导时间等诱导产酶条件进行优化。经过优化最佳摇瓶发酵产酶条件为:37℃培养重组菌至对数生长前期,添加诱导剂IPTG至终浓度为0.3 g/L,20℃下诱导10 h,酶活达到最高,为570 U/L。在此基础上通过发酵罐高密度培养手段将菌体浓度OD600进一步提高到98,酶活大幅度提高到9 436 U/L,该研究结果为HepⅡ的工业化生产与应用奠定了良好的基础。